[专著]:郭爱珍,李金祥,陈焕春.牛病图鉴[M].北京: 中国农业技术出版社,2021. 牛沙门氏菌病,俗称犊牛副寒伤,是由沙门氏菌属菌引起的一种临床上以败血症和肠炎为主要特征的传染病,主要侵害幼龄犊牛,有的可引起妊娠牛发生流产。 该病的病原体主要有鼠伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、纽波特沙门氏菌,均属于肠杆菌科沙门氏菌属成员。沙门氏菌大小为(0.7~1.5)μm x(2~5)μm,为两端钝圆的直杆状菌(图1)。该菌不产生芽孢,一般无荚膜,都有周鞭毛(除鸡白痢沙门氏菌等外),能运动,绝大多数有菌毛,可吸附于宿主细胞表面和凝集细胞,革兰氏染色为阴性。沙门氏菌为需氧或兼性厌氧菌,最适生长温度为35~37℃,最适pH值为6.8~7.8。 图1 牛沙门氏菌的菌体形态和SS培养基上菌落形态 该菌对营养要求不高,能在普通平板培养基上生长。经37℃24 h培养,在普通平板上能形成肉眼可见圆形菌落直径2~3 mm、光滑、湿润、无色、半透明、边缘整齐。
各年龄的牛均易感,且以10~40日龄的犊牛最为易感。病牛和带菌牛是该病的主要传染源细菌随粪便、尿液、乳汁以及流产的胎儿、胎衣和羊水排出,污染水源和饲料,经消化道感染健康牛;病牛和健康牛交配或用病牛的精液人工授精也可发生感染。该病一年四季均可发生,在犊牛中多传播迅速,呈流行性发作。
1.犊牛
犊牛随着感染菌的种型不同,病情也不同,3周龄左右多发。经2d或数天潜伏期后,呈现食欲不振、拒食、发热、卧地不起、脱水、消瘦、迅速衰竭(图2)。急性病例常于2~3d内死亡尸检无特殊变化,但从血液和内脏器官可分离出沙门氏菌。
多数犊牛在出生后10~14d发病,临床症状表现为体温骤升至41℃,1d后排出恶臭水样稀便粪便内混有黏液和血丝,常在1周后病死,死亡率高达50%。总之,一般病程在1周左右,稍微长的可伴有腕关节、跗关节肿大,有的还伴有严重的支气管炎和肺炎。
牛病
图2 病牛精神沉郁,极度消瘦
2.成年牛
成年牛感染后,表现出40℃左右的高热症状,伴有食欲废绝、脉搏紊乱、呼吸困难、心力衰竭昏迷不醒等症状。大部分牛在染病后12~24 h,表现出腹泻症状,粪便中含有血块、黏液、纤维素絮片,并伴有恶臭味,母牛有的出现流产。下痢后体温降至正常或略高,病牛可在1~2d内死亡,多数在1-5d内死亡。病程稍长的会出现严重的脱水症状,眼窝下陷,结膜充血(图3、图4)。
牛病图3 病牛脱水,眼窝下陷,水样腹泻
图4 病牛粪便中带血,有的出现流产
1.细菌学诊断
(1)涂片镜检。无菌采取病(死)牛的肝、脾、心血、粪便、肠系膜淋巴结等组织病料。制备涂片,自然干燥后,用革兰氏染色法染色、镜检。该菌革兰氏染色呈阴性.为两端钝圆或卵圆的小杆菌,不形成荚膜。
(2)分离培养。将采取到的上述病料,接种于沙门氏菌增菌培养基上或直接用病料划线于沙门氏菌属、志贺氏菌属琼脂培养基、胆硫乳琼脂培养基等培养基上,同时再接种到麦康凯鉴别培养基上,经过37℃培养24 h。沙门氏菌的菌落一般为无色透明或半透明,中等大小,边沿整齐、光滑、湿润,中心稍隆起,有的菌株因产生硫化氢而在沙门氏菌属、志贺氏菌属琼脂培养基、胆硫乳琼脂培养基等琼脂上形成中心黑色菌落。
(3)生化试验。挑选可疑菌落接种于三糖铁琼脂(TSI)上,经37℃培养24 h后,若斜面不变色,仅试管底层产酸或产酸产气,或底层产硫化氢(变黑),可初步确定为沙门氏菌。
2.免疫学诊断方法
(1)乳胶凝集试验。该试验是将特异性的抗体包被在载体颗粒上,通过抗体与相应的细菌抗原结合,产生肉眼可见的凝集反应进行鉴定。该方法能够用于检测牛、羊淋巴结中的沙门氏菌,试验操作简便、快速、敏感性高、特异性强。
(2)胶体金免疫层析。该方法的原理是利用氯金酸在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金额粒,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。目前广泛应用于快速检测行业,一般约10 mm就能完成,简便快速。
3.分子生物学诊断方法
(1)聚合酶链式反应。PCR应用于沙门氏菌的快速检测在国内外已有大量报道,绝大部分是针对沙门氏菌的invA靶基因、hilA靶基因、fi
mA靶基因和stn靶基因等进行检测,但由于日常样品测中影响PCR反应结果的因素太多,目前国内外尚无统一的检测标准,除了常规PCR技术外,重PCR技术、荧光定量PCR技术的应用也很普遍。
(2)核酸探针技术。核酸探针是能识别特异碱基序列的一段单链DNA或RNA分子。利用美国分析化学家协会认可的GENE-TARK沙门氏菌探针分析法,对239株沙门氏菌检出率为100%,假阳性率为0.8%Al meida等利用核酸探针检测沙门氏菌,检测低限为1CFU/10g(mL),方法特异和敏感性均为100%。
1.治疗
抗生素治疗可选用以下药物:庆大霉素每千克体重1~1.5 mg,肌内注射,每日2次;磺胺甲基嘧啶每千克体重0.08~0.2g,口服,每日2次;链霉素每千克体重10mg,肌内注射,每日2次;磺胺脒每千克体重0.1~0.3g,肌内注射,每日2次。必要时可进行药敏试验,筛选敏感药物。
在应用上述药物治疗的同时,配合调整肠胃功能.将葡萄糖(含量67.53%)、氯化钠(含量4.34%)、甘氨酸(含量10.3%)、枸橼酸(含量0.81%)、枸橼酸钾(含量0.21%)、磷酸二氢钾(含量6.8%)混合调配,取混合药物64g,加入2000mL水,停乳2d,口服饮用,每日2次,每次1000mL对流产母牛,还需用0.5%高锰酸钾溶液冲洗阴道和子宫。伴发子宫内膜炎时,可用长效土霉素子宫灌注。
2.预防
(1)免疫接种。定期进行免疫接种,如肌内注射牛副伤寒氢氧化铝疫苗,1岁以下每次1~2mL 2岁以上每次2~5mL。
(2)加强饲养管理。加强母牛及犊牛的饲养管理,消除各种致病诱因。及时清扫牛舍,彻底清除舍内的污物及粪便,定期组织消毒,破坏细菌滋生的外部条件。定期检查饮水及所用饲料质量状况,保证食源洁净卫生。
(3)及时饲喂初乳。保证犊牛尽早吃上初乳,尽快获得母源抗体,抵御疾病袭击。
(4)加强检疫。加强疾病检疫工作,及时检出患病牛及带菌牛。根据疫病检疫结果,对有治疗价值的病牛,应进行隔离治疗。病重牛可予以淘汰,病死牛应进行无害化处理,深埋或焚烧,不能食用。
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供稿:耿 宽
审核:谷淑华
运营:耿 宽
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